o nga Miihini Kohatu Hainamana
Ka whakamahia e tenei kete he punaha putunga lysis ahurei ka taea te tuku tere i te RNA mai i nga tauira pūtau ahurea mo nga tauhohenga RT-qPCR, na reira ka whakakore i te mahi purei RNA e pau ana te wa me te mahi.Ko te tauira RNA ka taea i roto i te 7 meneti noa iho.Ko te 5×Direct RT Mix me te 2×Direct qPCR Mix-SYBR reagents e whakaratohia ana e te kete ka taea te whiwhi tere me te whai hua i nga hua PCR ine i te waa.
5×Direct RT Mix me 2×Direct qPCR Mix-SYBR he kaha te aukati aukati, a ka taea te whakamahi i te lysate o nga tauira hei tauira mo RT-qPCR tika.Kei roto i tenei kete te RNA high-affinity Foregene reverse transcriptase, me Hot D-Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, tauhohenga buffer, PCR optimizer and stabilizer.
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Wāhanga I | Kaipupuri CL |
Foregene Protease Plus II | |
Kaipupuri ST | |
Wahi II | Pūkōmuru DNA |
5× Direct RT Mix | |
2× Tikanga qPCR Mix-SYBR | |
50× ROX Waikano Tohutoro | |
RNase-Free ddH2O | |
Tohutohu |
■ He ngawari me te whai hua : me te hangarau Cell Direct RT, ka taea te tiki tauira RNA i roto i te 7 meneti noa.
■ He iti te tono tauira, tae noa ki te 10 nga pūtau ka taea te whakamatautau.
■ Te whakaputanga teitei: ka taea te kite tere i te RNA i roto i nga pūtau i whakatipuria i roto i nga papa 384, 96, 24, 12, 6-puna.
■ Ka taea e te Kaimuku DNA te tango tere i nga momo ira i tukuna, ka tino whakaiti i te paanga ki nga hua whakamatautau ka whai ake.
■ Ko te punaha RT me te qPCR kua arotauhia ka pai ake te whakamaaramatanga whakamuri o te RT-PCR e rua, me te PCR motuhake ake, me te kaha ake ki te aukati i nga aukati tauhohenga RT-qPCR.
Te whānuitanga o te tono: nga pūtau ahurea.
- RNA i tukuna e te tauira lysis: e tika ana ki te tauira RT-qPCR o tenei kete.
- Ka taea te whakamahi i te kete mo nga kaupapa e whai ake nei: te tātari whakaaturanga ira, te manatoko o te awenga whakangau ira-whakawaenga a siRNA, te tirotiro tarukino, aha atu.
Ko te wahanga I o tenei kete me pupuri ki te 4 ℃;Ko te waahanga II me penapena ki te -20 ℃.
Ko te Foregene Protease Plus II me penapena ki te 4 ℃, kaua e whakatio ki te -20 ℃.
Reagent 2×Direct qPCR Mix-SYBR me penapena ki -20 ℃ i roto i te pouri;ki te whakamahia auau, ka taea hoki te penapena ki te 4 ℃ mo te rokiroki mo te wa poto (whakamahia i roto i nga ra 10).
Kia rite ki o hiahia ake, whiriwhiria nga tikanga hoahoa me nga tikanga whakamahere tino whaitake