an'ny Machine Stone Sinoa
Ity kitapo ity dia mampiasa rafitra lysis buffer tokana izay afaka mamoaka haingana ny RNA avy amin'ny santionan'ny sela kolontsaina ho an'ny fanehoan-kevitry ny RT-qPCR, ka manafoana ny dingana fanadiovana RNA mandany fotoana sy miasa.Ny môdely RNA dia azo alaina ao anatin'ny 7 minitra monja.Ny 5×Direct RT Mix sy ny 2×Direct qPCR Mix-SYBR reagents nomen'ny kitapo dia afaka mahazo haingana sy mahomby ny valin'ny PCR amin'ny fotoana tena izy.
5 × Direct RT Mix sy 2 × Direct qPCR Mix-SYBR dia manana fandeferana mahery vaika, ary ny lysate ny santionany dia azo ampiasaina ho modely ho an'ny RT-qPCR mivantana.Ity kitapo ity dia misy ny RNA tsy manam-paharoa amin'ny Foregene reverse transcriptase, ary Hot D-Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, réaction buffer, PCR optimizer ary stabilizer.
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Fizarana I | Buffer CL |
Foregene Protease Plus II | |
Buffer ST | |
Fizarana II | ADN Eraser |
5× Direct RT Mix | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | |
50 × ROX Reference Fandokoana | |
RNase-Free ddH2O | |
torolalana |
■ Tsotra sy mahomby : miaraka amin'ny teknolojian'ny Cell Direct RT, ny santionan'ny RNA dia azo alaina ao anatin'ny 7 minitra monja.
■ Kely ny fitakiana santionany, hatramin'ny sela 10 no azo andrana.
■ Fampidirana avo lenta: afaka mamantatra haingana ny RNA ao amin'ny sela kolontsaina ao amin'ny takelaka 384, 96, 24, 12, 6-lavadrano izy.
■ ADN Eraser dia afaka manala haingana ireo génome navoaka, mampihena be ny fiantraikan'ny voka-panadinana manaraka.
■ Optimized RT sy qPCR rafitra mahatonga ny roa-dingana RT-PCR transcription mivadika ho mahomby kokoa sy PCR manokana kokoa, ary mahatohitra kokoa RT-qPCR fanehoan-kevitra inhibitors.
Fampiharana: cellule cultié.
- RNA navoakan'ny santionany lysis: azo ampiharina amin'ny maodely RT-qPCR an'ity kitapo ity ihany.
- Ny kitapo dia azo ampiasaina amin'ireto tanjona manaraka ireto: famakafakana fanehoana ny fototarazo, fanamarinana ny vokatry ny fampanginana ny fototarazo mpanelanelana siRNA, fitiliana zava-mahadomelina, sns.
Ny ampahany I amin'ity kitapo ity dia tokony hotehirizina amin'ny 4 ℃;Ny ampahany II dia tokony hotehirizina amin'ny -20 ℃.
Ny Foregene Protease Plus II dia tokony hotehirizina amin'ny 4 ℃, aza mangatsiaka amin'ny -20 ℃.
Reagent 2×Direct qPCR Mix-SYBR dia tokony hotehirizina amin'ny -20 ℃ ao anaty haizina;raha ampiasaina matetika, dia azo tehirizina amin'ny 4 ℃ ihany koa ho an'ny fitehirizana fohy (ampiasaina ao anatin'ny 10 andro).
Arakaraky ny tena filanao, fidio ny fomba famolavolana sy drafitra amin'ny ankapobeny indrindra